تحضير دواء مصاحب من الاندوميثاسين وحامض الاسكوربيك ودراسة تأثيره على انزيم اسباراتيت امينو ترانسفيريز المنقى جزئيا من امصال مرضى داء السكر من النوع الثاني

هدفت الدراسة الى تحضير دواء مصاحب استري جديد واستخدم لهذا الغرض حامض الاسكوربيك فيتامين C كحامل كحولي لدواء الاندوميثاسين عن طريق تفاعل الاسترة , و التنقية الجزئية لإنزيم الاسباراتيت امينو ترانسفيريز من أمصال دم المصابين بداء السكر النوع الثاني , وتمثل الخطوات الآتية :1- تحضير كلوريد حامض الاندوميثاسين من تفاعل الاندوميثاسين مع كلوريد الثايونيل . وتفاعل الأسترة لمجموعة الهيدروكسي في المركب الحامل فيتامين Cمع كلوريد حامض الاندوميثاسين لينتج استر الاندوميثاسين . وقد تم تأكيد الصيغة التركيبية للمركب المحضر باستخدام الطرق الطيفية (FTIR) .2- قياس فعالية إنزيم اسباراتيت امينو ترانسفيريز في مصل دم المصابين بداء السكر و مصل دم الأصحاء . شملت الدراسة (35) عينة لمصل المصابين بداء السكر النوع الثاني و (25) عينة لمصل الأصحاء مجموعة السيطرة فلوحظ ارتفاع معنوي عالي عند مستوى احتمالية(p<0.001) في فعالية إنزيم الاسباراتيت امينو ترانسفيريز في الأشخاص المصابين بداء السكر النوع الثاني مقارنة بما هو عليه في الأشخاص الأصحاء .3- استخدمت تقنية الترشيح الهلامي باستعمال عمود الهلام Sephadex G100, لغرض تنقية إنزيم الاسباراتيت امينو ترانسفيريز من أمصال الأشخاص المصابين بداء السكر النوع الثاني واستخدام محلول منظم من الــ(phosphate buffer) ذي الأس الهيدروجيني (7.4) لفصل الإنزيم .4- درست حركية إنزيم اسباراتيت امينو ترانسفيريز , حيث درس تأثير التراكيز المختلفة من المادة الأساس L_asparatate وكذلك درس تأثير الأس الهيدروجيني pH. و درجة الحرارة المثلى لعمل الإنزيم كانت 37 م° ودرس تأثير زمن التفاعل على فعالية الإنزيم . 5- حضرت سبعة تراكيز مختلفة من المركب المحضر (Prodrug) وأجريت عليها دراسة إنزيمية شملت تقدير فعالية إنزيم اسبارتيت امينو ترانسفيريز بوجود وعدم وجود المركب المحضر خارج الخلية الحية فكان هناك انخفاض في فعالية إنزيم اسباراتيت امينو ترانسفيريز مع زيادة تركيز المركب المحضر .ودرس نوع التثبيط للمركب المحضر على فعالية إنزيم الاسباراتيت امينو ترانسفيريز وكان التثبيط من النوع اللا تنافسي .6- للتأكد من حدوث عملية تحلل للدواء المصاحب الاستري للاندوميثاسين , تم إجراء دراسة تحلل الدواء في أوساط مختلفة من الدوال الحامضية pH عند (2 , 4 ) ودوال قاعدية pH عند ( 8 , 10 ).